碧云天的NADP⁺/NADPH檢測(cè)試劑盒(WST-8法) (NADP⁺/NADPH Assay Kit with WST-8)是一種基于WST-8的顯色反應(yīng)，通過(guò)比色法來(lái)檢測(cè)細(xì)胞、組織或其它樣品中NADP⁺ (氧化型輔酶II)和NADPH (還原型輔酶II)各自的量、比值和總量的檢測(cè)試劑盒。
NADP⁺/NADPH以及NAD⁺/NADH的傳統(tǒng)檢測(cè)方法是檢測(cè)NADPH或者NADH在340nm處吸收波長(zhǎng)的變化，該方法靈敏度較低并易受樣品中有類似紫外吸收物質(zhì)的干擾，并且在紫外檢測(cè)過(guò)程中通常需要加大檢測(cè)樣品量以彌補(bǔ)NADPH在340nm處吸光度過(guò)小的不足，因此該檢測(cè)方法具有很大的局限性。
WST-8是MTT的一種升級(jí)替代產(chǎn)品，和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)。首先，MTT被一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶液來(lái)溶解；而WST-8和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的，可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次，WST-8產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更加穩(wěn)定，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加穩(wěn)定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比，線性范圍更寬，靈敏度更高。
WST-8和WST-1相比，檢測(cè)靈敏度更高，更易溶解，并且更加穩(wěn)定。
本試劑盒使用便捷，無(wú)需分離純化細(xì)胞、組織或其它樣品中的NADP⁺和NADPH，且特異性檢測(cè)NADP⁺和NADPH，而不檢測(cè)NAD⁺和NADH。本試劑盒可以檢測(cè)含量低至0.05μM (2.5pmol)的NADP⁺或NADPH，在0.05μM (2.5pmol)至6μM (300pmol)之間呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。
NADP (Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸)是很多氧化還原反應(yīng)的輔酶，包括NADP⁺ (氧化型)和NADPH (還原型)兩種形式。NADP⁺也參與到生物合成反應(yīng)中，比如脂質(zhì)和核酸的合成。在動(dòng)物細(xì)胞中，戊糖磷酸途徑(pentose phosphate pathway，PPP)的氧化階段是NADPH最主要的來(lái)源。
本試劑盒可檢測(cè)樣品中的NADP⁺、NADPH以及它們的比值，具體原理如下：